Avaliação da sororretividade cruzada entre a infecção por Trypanosoma caninum e a leishmaniose visceral canina / Evaluation of serological cross-reactivity between natural infection by Trypanosoma caninum and canine visceral leishmaniasis

Os testes sorológicos constituem um importante instrumento para o diagnóstico da leishmaniose visceral (LV), sendo os inquéritos sorológicos caninos uma das medidas recomendadas pelo Ministério da Saúde brasileiro, para o controle da doença humana. Trypanosoma caninum é um parasita recentemente descrito em cães domésticos em diferentes áreas de LV. Considerando a importância do cão no ciclo de transmissão de L. chagasi e a possibilidade desse novo parasita confundir o diagnóstico para leishmaniose, este estudo objetivou investigar o status sorológico de animais infectados por T. caninum e avaliar a reatividade cruzada com os testes sorológicos empregados na rotina de controle da LV no Brasil. Foram analisadas 117 amostras de soro de cães classificadas em 3 grupos: grupo Tc (animais infectados por T. caninum), grupo Lc (infectados por L. chagasi) e grupo Co (controles saudáveis) - com os kits disponibilizados para a rede pública - imunofluorescência indireta (IFI-LVC), ELISA (EIE-LVC) e teste imunocromatográfico (DPP) - e com testes in house empregando antígenos de T. caninum (IFI-Tc e ELISA-Tc) e de L. chagasi (IFILc e ELISA-Lc). Os cães infectados por T. caninum reagiram ao IFI-Tc e ELISA-Tc com sensibilidade de 64.1 por cento e 94.9 por cento e especificidade de 23.1 por cento e 35.9 por cento, respectivamente. Para os testes comerciais IFI-LVC, EIE-LVC e DPP, a sensibilidade foi de 100 por cento e especificidade de 70.5 por cento, 68 por cento e 97.5 por cento respectivamente. A especificidade destes testes tornou-se mais elevada quando o grupo Tc foi excluído das análises, com diferença significativa para IFI-LVC (x2=4.36, p=0.036) e não significativa para os demais testes (EIE-LVC - x2=2,87, p=0,089; DPP - x2=0,05, p=0,818)...

Serologic tests constitute an important tool for the diagnosis of visceralleishmaniasis (VL), being canine serologic inquiries one of the measuresrecommended by the Brazilian Health Ministry, to control the human disease.Trypanosoma caninum is a parasite recently described in domestic dogs indifferent endemic areas of LV. Considering the importance of the dog to thecycle of transmission of L. chagasi and the possibility of this new parasite toconfuse the diagnosis for leishmaniasis, this study aimed to investigate theserological status of animals infected by T. caninum and to evaluate the crossreactivityin serologic tests employed to the routine control of the LV in Brazil. Aset of 117 serum samples of dogs divided into 3 groups had been analyzed - Tcgroup (animals infected by T. caninum), Lc group (animals infected by L.chagasi) and Co group (healthy controls) - with kits available for the healthpublic services - indirect imunofluorescence test (IFI-LVC), ELISA (EIE-LVC)and immunocromatographic test (DPP) - and with in house tests using T.caninum (IIF-Tc and ELISA-Tc) and L. chagasi (IIF-Lc and ELISA-Lc) antigens. Dogs infected by T. caninum had reacted to IIF-Tc and ELISA-Tc with sensitivityof 64.1 percent and 94.9 percent , and specificity of 23.1 percent and 35.9 percent , respectively. Forcommercial tests IFI-LVC, EIE-LVC and DPP, sensitivity were of 100 percent andspecificity of 70.5 percent , 68 percent and 97,5 percent respectively...

Use of elisa employing homologous and heterologous antigens for the detection of IgG and subclasses (IgG1 and IgG2) in the diagnosis of Canine visceral leishmaniasis / A utilização do ELISA empregando antígenos homólogos e heterólogos para a detecção de IgG e subclasses (IgG1 e IgG2) no diagnóstico de Leishmaniose visceral canina

Indirect immunofluorescence is the method recommended for the diagnosis of visceral leishmanisis in dogs, however, the accuracy of this technique is low and its use on a large scale is limited. Since ELISA does not present these limitations, this technique might be an option for the detection of IgG or specific IgG1 and IgG2 subclasses. Canine ehrlichiosis is an important differential diagnosis of American Visceral Leishmaniasis (AVL). The present study compared ELISA using Leishmania chagasi and Leishmania braziliensis antigen for the detection of anti-Leishmania IgG and subclasses in serum samples from 37 dogs naturally infected with L. chagasi (AVL) and in samples from four dogs co-infected with L. braziliensis and L. chagasi (CI). The occurrence of cross-reactivity was investigated in control serum samples of 17 healthy dogs (HC) and 35 infected with Ehrlichia canis (EC). The mean optical density obtained for the detection of IgG was significantly higher when L. chagasi antigen was used, and was also higher in subgroup VLs (symptomatic) compared to subgroup Vla (asymptomatic). The correlation between IgG and IgG1 was low. The present results suggest that IgG ELISA using homologous antigen yields the best results, permitting the diagnosis of asymptomatic L. chagasi infection and the discrimination between cases of AVL and ehrlichiosis in dogs.

A imunofluorescência indireta é o método recomendado para o diagnóstico de leishmaniose visceral em cães, entretanto, a acurácia dessa técnica é baixa e seu uso em grande escala é limitado. Uma vez que o ELISA não apresenta essas limitações, essa técnica poderia ser uma opção para a detecção de IgG ou subclasses IgG1 e IgG2 específicas. A ehrlichiose canina é um importante diagnóstico diferencial de Leishmaniose Visceral Americana (LVA). O presente estudo comparou o ELISA usando antígenos de Leishmania chagasi e Leishmania braziliensis para a detecção de IgG e subclasses anti-Leishmania em amostras de soro de 37 cães naturalmente infectados com L. chagasi (LVA) e em amostras de quatro cães co-infectados (CI). A ocorrência de reatividade cruzada foi investigada em amostras de soro controle de 17 animais saudáveis (HC) e 35 de infectados por Ehrlichia canis (EC). A média de densidade óptica obtida para a detecção de IgG foi significantemente maior quando o antígeno de L. chagasi foi usado e também mais elevada no subgrupo LVs (sintomático) quando comparado ao subgrupo LVa (assintomático). A correlação entre IgG e IgG1 foi baixa. O presente resultado sugere que ELISA IgG empregando antígeno homólogo, produz os melhores resultados, permitindo o diagnóstico de infecção assintomática por L. chagasi e a discriminação entre casos de LVA e ehrlichiose em cães.